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      行業新聞

      南京普怡植物黃酮的分離純化

      2022-04-22

      黃酮類化合物的提取

      化合物:極性---溶劑萃取酸性---堿提酸沉解離性—離子交換

      (1)溶劑萃取法關鍵:溶劑的選擇溶劑選擇依據:黃酮類成分的存在狀態(游離、苷)及溶解度提取方法選擇依據:溶劑的溶解性能

      或CaO (2)堿提酸沉淀法酚羥基與堿成鹽,溶于水;加酸后析出。堿:常用Ca(OH2)水溶液。優點:含酚羥基化合物成鹽溶解,且可使含COOH的果膠、粘液質、蛋白質等雜質形成沉淀而除去。注意:堿性不宜過強,以免破壞黃酮母核;酸性(pH3-4)

      不宜過強,以免形成鹽而溶解。

      (3)炭粉吸附法:苷類的精制

      (4)離子交換法原理:酚羥基與堿成鹽,溶于水;用陰離子交換樹脂交換,加酸后析出,用有機溶劑洗脫。

      優點:可除去黃酮類化合物中的水溶性雜質??删泣S酮類化合物與金屬離子形成的鹽類或絡合物。

      (5)大孔吸附樹脂法

      2.黃酮類化合物的分離

      極性大小不同和吸附性差別,利用吸附(各種吸附柱)或分配原理進行分離。酸性強弱不同,利用梯度pH萃取法進行分離;分子大小不同,利用葡聚糖凝膠分子篩分離.分子中某些基團的特殊性質,利用金屬鹽絡合能力不同進行分離。常用分離方法:硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠柱層析、梯度pH萃取等。

      柱層析法(較常用的分離方法)常用吸附劑或載體:硅膠、聚酰胺及纖維素粉等。

      此外,也有氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。

      (1)硅膠柱層析

      (2)氧化鋁柱層析(少)不適合分離具有3-OH或5-OH、4-羰基及鄰二酚羥基黃酮類化合物。

         (3) 聚酰胺柱層析原理:酰胺羰基可與酚羥基形成氫鍵,可用于分離各種類型的黃酮類化合物;形成氫鍵主要指酚羥基,糖部分不參與形成氫鍵。

      (3)聚酰胺色譜(氫鍵吸附) 酚羥基數目越多,吸附能力越強。酚羥基數目相同的情況下,酚羥基所處的位置有利于形成分子內氫鍵,吸附能力減弱。3-OH或5-OH黃酮的吸附力小于其他位置-OH黃酮;鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或對位酚羥基黃酮分子內芳香化程度越高,共軛雙鍵越多,吸附力越強。查耳酮>二氫黃酮不同類性的黃酮類化合物,吸附力大?。狐S酮醇>黃酮>查耳酮>二氫黃酮(醇)>異黃酮

      洗脫規律:吸附能力越強,越難洗脫。苷元相同,洗脫先后順序一般是:三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元母核上增加羥基,洗脫速度減緩。

      不同類型黃酮化合物,先后流出順序一般是:異黃酮>二氫黃酮醇>黃酮>黃酮醇

      (4)葡聚糖凝膠柱層析雙重色譜原理

      分子篩作用(按分子大小分離)黃酮苷的分離洗脫順序:分子由大到小三糖苷>雙糖苷>苷元吸附原理(按極性大小分離)游離黃酮的分離極性由小到大1-OH>2-OH>3-OH>4-OHOH)鹽水溶液(0.5mol/L NaCl 常用的洗脫劑有:水溶液:堿性水溶液(0.1mol/L NH4等)。

      ②醇及含水醇:如甲醇、甲醇-水(不同比例)丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。其它溶劑:如含水丙酮、甲醇-氯仿等。

      (5)液滴逆流層析利用混合物中各組分在兩液相中分配系數的差異,移動相形成液滴通過固定相的液柱實現混合物的分離。不需要固體擔體,避免不可逆吸附造成的損失;常用的溶劑:氯仿-甲醇-水、氯仿-甲醇-丙酮-水

      (6) 高效液相色譜法(HPLC)應用:適用于各種黃酮類化合物的分離原理:反相柱色譜 流動相:水-乙腈、水與甲醇不同比例2)pH梯度萃取法依據:游離黃酮苷元酸性的差異

      3)根據分子中某些特定官能團進行分離鉛鹽法分離鄰二酚羥基(或兼有3-OH、4-羰基或5-OH、4-羰基)黃酮 + 醋酸鉛----沉淀一般酚類黃酮 + 堿性醋酸鉛----沉淀S進行復分解;硫酸鹽或磷酸鹽或陽離子交換樹脂。脫鉛處理:通入H2硼酸沉淀法鄰二酚羥基黃酮 + 硼酸---絡合物溶于水

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